抗體-藥物偶聯(lián)物即ADC是一類生物制藥藥物，是通過化學鏈將具有生物活性的小分子藥物連接到抗體上，抗體作為載體將小分子藥物靶向運輸?shù)侥繕思毎斜辉O計用于治療癌癥的靶向療法。與化學療法不同，ADC 旨在靶向并殺死腫瘤細胞，同時保留健康細胞。類似的還有新興的AOC（抗體-寡核苷酸偶聯(lián)物）基因治療技術。

NanoPhotometer®超微量分光光度計作為標準的紫外-可見法分析設備，已廣泛的應用于包括ADC在內的單抗、雙抗的定量。同時，設備的多波長/全波長測量功能，能夠同時測量抗體及偶聯(lián)物的吸光值和濃度。這使測量藥物抗體比（DAR）變得十分方便。DAR能明顯影響ADC藥物的毒性。如DAR過低，則抗體攜帶的效率較低；反之，如DAR 過高，機體易將其識別為異物從而快速清除。DAR的異質性也可能導致毒性的不確定，造成毒性脫靶。

應用程序1  UV法蛋白定量

標準的UV法蛋白定量模塊，提供基于消光系數(shù)法的蛋白濃度測量，測量主波長默認為280nm，同時也可根據(jù)抗體樣品實際的最大吸收波長進行設置。對于空載抗體的定量，通常使用默認的UV280法，并使用默認的320nm背景校正。當測量ADC樣品時，由于偶聯(lián)藥物的吸收峰通常出現(xiàn)在300-400nm之間，并于抗體之間有連續(xù)的紫外吸收，因此建議關閉背景校正功能（對于澄清樣品），以獲得準確的吸光值/濃度。在此模式下，如想在獲得抗體濃度的同時，也測量偶聯(lián)物的吸光值，可點擊光譜曲線，可選擇查看任意波長下的吸光值，找到對應的偶聯(lián)物的最大吸收波長和吸光值即可。

應用程序2  多波長測量

在分析化學應用界面中，選擇單/多波長測量模塊，根據(jù)抗體和偶聯(lián)物的最大吸收波長，進行測量波長設置，并進行背景校正波長設置（可根據(jù)需要設置在可見光/近紅外波長區(qū)域）。測量結果可直接顯示抗體和偶聯(lián)物的吸光值，并輸出為報告。

應用程序3  比值測量

核酸樣品的A260/A280、A260/A230比值是大家熟知的，而對于其他樣品而言，吸光值比值測量模塊可支持自定義的雙波長下吸光值比值的計算。如抗體測量A280值，偶聯(lián)物測量A378，則可得到兩個波長的吸光值和比值結果，并輸出為報告。

ADC樣品測量的良好實踐：

1. 可使用N60/NP80的混勻器進行5-10秒的樣品充分混勻

2. 基于測量目的，選擇對應的應用程序

3. 正確設置背景校正波長，這非常重要

4. 正確的清潔，高濃度或高粘度樣品建議進行空白回測

NanoPhotometer®還可配置符合GxP及《藥品數(shù)據(jù)管理規(guī)范》要求的合規(guī)性軟件，具有多層級用戶管理、電子記錄和電子簽名、審計追蹤和接入控制等功能，滿足客戶的合規(guī)性流程需要，在包括ADC在內的生物制藥工藝開發(fā)、中試、生產、質控中具有廣泛的使用場景和用戶基礎。

* 本文轉載自「Implen超微量分光光度計」公眾號